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武汉科斯坦生物科技有限公司
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代谢组学
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抗体/蛋白
地 址:武汉市东湖新技术开发区高新大道666号,武汉
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技术服务:18971263062
E - mail :info@chemstan.com
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化合物单体
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Human SARS-CoV-2 Spike Protein S1(RBD) IgG ELISA检测试剂盒
六、检测范围
125pg/mL—8000pg/mL
七、最低检测限(MDD)
100pg/mL
MDD是测试20个零标准(稀释液)的平均O.D.值上加两倍标准差后计算相应的浓度来确定的。
八、精密度
批内差: CV<12%
批间差: CV<15%
九、稳定性
试剂盒按推荐温度保存6个月,信号强度降低小于10%。
十、实验细节说明
1. 在试剂盒标签上的有效期内使用,不要与其他厂家的试剂盒混合使用。
2. 如果样本检测值超出标准曲线范围,可适当调整稀释倍数并重新测定,或预估样本中抗体浓度,在实验之前预先稀释数个梯度同时进行测定。
3. 为避免交叉污染,不同标准品、样本、试剂的加样需更换移液枪头,每管试剂使用单独的容器储存。
4. 在孵育过程中贴紧封板膜。
5. 显色液避光保存,临用前15分钟从冰箱取出在室温平衡。
6. 浓缩清洗液(20×)需使用去离子水1:20稀释至工作浓度,去离子水不包含在试剂盒中,需实验人员自备。
7. 终止液为酸性溶液,具有轻微腐蚀性,使用时避免接触皮肤、眼、耳、口等暴露部位,如不慎接触,使用大量清水冲洗后观察接触部位反应,如情节严重请及时就医。
8. 试剂盒酶标板条可按需拆卸使用,已开封的试剂盒建议在1个月内使用,未开封的试剂盒所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存,收到试剂盒后请将阳性对照、检测溶液 A、检测溶液 B、以及预包板保存于-20℃,其余试剂请置于 4 ℃保存备用。
十一、常见问题解决指南
问题 |
原因 |
解决方案 |
标准曲线差 |
移液不精确 |
检查和校正移液器 |
标准品准备不正确 |
进行正确的标准品梯度稀释 |
|
O.D 值低 |
孵育时间太短 |
保证充足的孵育时间 |
温度不正确 |
试剂平衡至室温并保证孵育温度正确 |
|
试剂体积不正确 |
检查移液器并确保加样体积与说明书一致 |
|
精密度低 |
移液不精确 |
检查和校正移液器 |
混匀不充分 |
充分混匀和吸取试剂 |
|
洗涤不充分 |
按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
|
背景值高 |
洗涤不充分 |
按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
清洗液污染 |
重新配置清洗液 |
|
灵敏度低 |
试剂盒储存不当 |
试剂盒短期整体保存于4℃,长期保存根据说明书分开保存各组分 |
样品清单及储存条件
样品名称 |
规格 |
描述 |
推荐储存条件 |
预包板 |
1 板 |
96孔聚苯乙烯微孔板(12列*8孔),预包被RBD蛋白。 |
密封状态放置于-20℃保存。 |
阳性对照 |
1管 |
10μL重组人源RBD抗体,浓度0.8mg/mL。 |
放置于-20℃ 保存。 |
检测溶液A |
1管 |
10μL生物素标记的抗人IgG抗体,临用前用检测溶液稀释液1:10000稀释至工作浓度。 |
放置于-20℃ 保存。 |
检测溶液B |
1管 |
12μL HRP标记的链霉亲和素,临用前用检测溶液稀释液1:2000稀释至工作浓度。 |
放置于-20℃ 保存。 |
样本稀释液 |
1 瓶 |
25 mL稀释液(含防腐剂),用于阳性对照、血清、血浆的稀释。 |
放置于4℃ 保存。 |
检测溶液稀释液 |
1 瓶 |
25 mL稀释液(含防腐剂),用于检测溶液A,检测溶液B的稀释。 |
放置于4℃ 保存。 |
浓缩清洗液 |
1 瓶 |
25 mL (20×)浓度的清洗液(含防腐剂),临用前用去离子水1:20稀释至工作浓度。 |
放置于4℃ 保存。 |
显色液 |
1 瓶 |
12 mL TMB(四甲基联苯胺)。 |
放置于4℃ 保存。 |
终止液 |
1 瓶 |
6 mL 2M 酸液。 |
放置于4℃ 保存。 |
封板膜 |
4 片 |
用于实验中封闭酶标板。 |
放置于常温保存。 |
在试剂盒保质期内使用
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