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  • 产品名称: Cdc42 Activation Assay Kit
  • 产品货号: 80701
  • 货期: 现货
  • 价格与订购: 6800
  • 数量:
    库存: 5
  • 规格: 96T
  • 产品信息
  • 如何订购
    产品说明
         小G蛋白是从属于细胞调节因子中的一个超家族。Rho家族是小G蛋白中的一个亚家族,它在细胞运动、细胞分裂以及基因转录中发挥主要作用。而本试剂盒中的Cdc42就属于Rho亚家族中的一种, Cdc42参与生理活动过程中其分子结构会呈现出2种相互转换的形式:与GTP结合的激活状态和与GDP结合的非活性状态。
           目前Cdc42蛋白活性的检测主要是依据小GTP酶Cdc42可以与p21活化激酶(PAK)的p21结合区域(PBD)结合,使PAK活化从而发挥生物学功能,进而间接的进行Cdc42活性功能的监测。然而此方法在检测过程中存在着一定的局限性比如GTP水解成GDP的速度过快以及Cdc42-GTP结合蛋白与p21结合区域之间较低的亲和力,导致这种检测方法的重复性较差。
          武汉科斯坦生物技术有限公司推出的Cdc42活性检测试剂盒主要是依据单克隆抗体能够特异性的识别Cdc42-GTP结合蛋白,而不识别Cdc42-GDP结合蛋白,进而简单并且快速的进行Cdc42的活性检测。同时试剂盒中的Cdc42-GTP单克隆抗体也可以进行免疫组化实验中细胞和组织中Cdc42的活性监测。每套试剂盒可以进行20次检测。
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    检测原理
    武汉科斯坦生物技术有限公司的Cdc42活性检测试剂盒主要是利用识别蛋白特异形态的Cdc42-GTP单克隆抗体特异性的去检测细胞提取物或者体外的(样品需要进行GTPγS活化处理)活性Cdc42-GTP的水平。简言之,特异性识别Cdc42活化构象的鼠单克隆抗体可以特异性结合细胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白,然后利用protein A/G将抗原抗体的结合物吸附下来,再利用特异性识别Cdc42活化构象的兔多克隆抗体进行免疫印迹分析进行检测。
    试剂盒成分
    1. 特异性识别Cdc42活性构象的鼠单克隆抗体(Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)):小管装--30ul (抗体浓度是1mg/ml),抗体溶于PBS(pH7.4)并包含50%的甘油和0.05%的叠氮化钠。此抗体可以特异性识别所有脊椎动物中的Cdc42-GTP。
    2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) :小管装—400ul包含200ul Protein A/G agarose     和200ul 20%乙醇溶液。(使用时溶液需要充分混匀,再吸取)
    3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303):小瓶装—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0),     750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
    4. 特异性识别Cdc42活性构象的兔多克隆抗体(Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody  (Catalog No.21010)):小管装--30ul (抗体浓度是1mg/ml),抗体溶于PBS(pH 7.4)并包含有   50%的甘油
    5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) :小管装—100ul (10 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用      5ul GTPγS标记。
    6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) :小管装—100ul (100 mM) ,实验中0.5mL细胞裂解液使用5ul GDP标记。
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    储存条件
    试剂盒的成分在试剂盒的有效期限内必须存放于4°C条件下保存。
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    Note
    For Research Use Only.