热稳定核酸内切酶 IV 来源于嗜热细菌，为脱嘌呤/脱嘧啶（AP）位点特异性的核酸内切酶。该酶切割 AP 位点 5´ 端的第一个磷酸二酯键，产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除天然

的 AP 位点外，各种人工合成的 Spacer 分子也能够被内切核酸酶 IV 有效切割，包括 THF、SpacerC3、Spacer C12、Spacer 9，Spacer 18 等。该酶也具有 3´二酯酶活性，能从 DNA 的 3´末端释放磷酸甘油醛（phosphoglycoaldehyde）、α,β-不饱和醛（α,β-unsaturated aldehydes）、3’-磷酸、其它 3' blocking groups。该酶还能够作用于 DNA 分子的几种氧化性损伤，水解氧化损伤碱基的5’端第一个磷酸二酯键。另外，该酶还具有 3´-5´的外切酶活性。酶活性受到金属离子、DTT、EDTA

等的影响，优先作用于 3´凹末端的双链 DNA。

本公司热稳定核酸内切酶 IV 是在大肠杆菌中重组表达，并亲和纯化的重组蛋白。

1 单位指在 65℃ 条件下，1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点的 34 bp 荧光标记的寡核苷酸双链所需要的酶量。

AP 位点的制备方法如下：37℃条件下，用 1U 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）处理 10 pmol含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
活性测定：1× AM Buffer E：10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃），65℃ 温育。

-20℃保存

具有很好的热稳定性，可以在 65-75℃反应；

在多种反应体系中均有活性。

1.与高温 UDG 一起改善高忠实性 DNA 聚合酶 PCR 扩增性能

2.单细胞凝胶电泳（彗星试验）；

3.切断合成的寡核苷酸中各种 Spacer，例如，Spacer C3，Spacer C18，Spacer 9 等；

4.修复损伤的 DNA。

相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。

 该酶的最佳反应温度为 65-70°C。该酶与 PCR 反应条件兼容。

 彗星试验的推荐稀释度：1:104-1:10