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  • 产品名称: 热稳定核酸内切酶IV
  • 产品货号: CSAE1142
  • 货期: 现货
  • 价格与订购: 480
  • 数量:
    库存: 5
  • 规格: 500u 2500u
  • 产品信息
  • 如何订购
    产品说明
    热稳定核酸内切酶 IV 来源于嗜热细菌,为脱嘌呤/脱嘧啶(AP)位点特异性的核酸内切酶。该酶切割 AP 位点 5´ 端的第一个磷酸二酯键,产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。除天然
    的 AP 位点外,各种人工合成的 Spacer 分子也能够被内切核酸酶 IV 有效切割,包括 THF、SpacerC3、Spacer C12、Spacer 9,Spacer 18 等。该酶也具有 3´二酯酶活性,能从 DNA 的 3´末端释放磷酸甘油醛(phosphoglycoaldehyde)、α,β-不饱和醛(α,β-unsaturated aldehydes)、3’-磷酸、其它 3' blocking groups。该酶还能够作用于 DNA 分子的几种氧化性损伤,水解氧化损伤碱基的5’端第一个磷酸二酯键。另外,该酶还具有 3´-5´的外切酶活性。酶活性受到金属离子、DTT、EDTA
    等的影响,优先作用于 3´凹末端的双链 DNA。
    本公司热稳定核酸内切酶 IV 是在大肠杆菌中重组表达,并亲和纯化的重组蛋白。
    活性定义
    1 单位指在 65℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点的 34 bp 荧光标记的寡核苷酸双链所需要的酶量。
    AP 位点的制备方法如下:37℃条件下,用 1U 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 10 pmol含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
    活性测定:1× AM Buffer E:10 mM KCl,20 mM Tris-HCl,10 mM (NH4)2SO4,2 mM MgSO4,0.1% Trition X-100(pH 8.8 @ 25℃),65℃ 温育。
    浓度
    10U/μl
    保存条件
    -20℃保存
    产品特点
    具有很好的热稳定性,可以在 65-75℃反应;
    在多种反应体系中均有活性。
    适用范围
    1.与高温 UDG 一起改善高忠实性 DNA 聚合酶 PCR 扩增性能
    2.单细胞凝胶电泳(彗星试验);
    3.切断合成的寡核苷酸中各种 Spacer,例如,Spacer C3,Spacer C18,Spacer 9 等;
    4.修复损伤的 DNA。
    产品包装规格及组成
    Component AE1142A AE1142B
    Tth内切核酸酶 IV 500U 2.5kU
    10×AM BufferE 0.2ml 1m
    质量控制
    相关测试表明无外源内切、外切脱氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法检测无宿主残余DNA。
    酶贮存缓冲液
    20 mM Tris-HCl,150 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol, pH 8.0 @ 25°C。
    注意事项
     该酶的最佳反应温度为 65-70°C。该酶与 PCR 反应条件兼容。
     彗星试验的推荐稀释度:1:104-1:10
    Note
    For research use only .