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- 产品名称: Mycoplasma PCR Test Kit
- 产品货号: CSK00002
- 货期: 现货
- 价格与订购: 2800
- 数量: 
                            库存: 1000
- 规格:
- 产品信息
- 如何订购
  	概述(Summary)icon
  	产品英文名(Product Name)
  	Mycoplasma PCR Test Kit
  	产品中文名
  	支原体PCR检测试剂盒
  	产品描述(Description)
  	支原体PCR检测试剂盒是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s rRNA 基因保守区域片段,进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis,M. hominis,M. hyorhinis,M. fermentans,M. orale,M. salivarium,M. bovis,M. bovigenitalium,M.pneumoniae,M. pirum等在内的数十种常见支原体。
  	储存条件(Storage)
  	储存于-15 ~ -25℃。
  	运输方式(Shipping)
  	干冰运输。
  	Note
  	For research use only .
  	使用方法(Standard Operating Procedure)icon
  	1. 收取待检样品。贴壁细胞:待细胞生长至80%左右即可,使用细胞刮刀刮取细胞(送检细胞不能用消化液消化细胞);悬浮细胞:待细胞生长至80%左右即可直接进入下一步离心;
2. 1000rpm离心5min,弃上清,留100-200μl培养基重悬细胞,沸水浴10min;
3. 将煮沸的细胞悬浮液12000rpm离心3-5min;
4. 所得样品取4μl直接用于PCR检测,或冻存于-20℃备用;
注:一般以6孔板接种细胞,当细胞生长至80-90%时即可取样进行检测。培养液中的青霉素和链霉素不会影响检测效果。
5. PCR检测
5.1充分融化PCR反应液,按照下表配制PCR反应体系:
| 组分 | 阳性对照组 | 阴性对照组 | 实验组 | 
| PCR反应液 | 14μl | 14μl | 14μl | 
| 引物 | 2μl | 2μl | 2μl | 
| 阳性对照 | 4μl | - | - | 
| 待检样本 | - | - | 4μl | 
| ddH2O | - | 4μl | - | 
5.2 将PCR反应管放入PCR仪,参照以下参数运行PCR反应程序:
| 程序 | 运行参数 | 循环数 | |
| 预变性 | 94℃ 5min | - | |
| 循环 | 变性 | 94℃ 30s | 30 | 
| 退火 | 55℃ 30s | ||
| 延伸 | 72℃ 15s | ||
| 延伸 | 72℃ 5min | - | |
5.3琼脂糖凝胶电泳。
6. 凝胶成像观察
注:支原体阳性细胞扩增片段约270bp。
M :marker
+ :阳性对照
- :阴性对照
1-3:检测为阳性的细胞
4-5:检测为阴性的细胞
 
            
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