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  • 产品名称: Bst DNA Polymerase Large Fragment
  • 产品货号: CSPC0820
  • 货期: 现货
  • 价格与订购: 1500
  • 数量:
    库存: 100
  • 规格: 8KU
  • 产品信息
  • 如何订购
    产品概述
    Bst DNA Polymerase Large Fragment是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,具有 5'→3' DNA聚合酶活性,以及很强的链置换活性,但缺失5'→3'核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,如LAMP(Loop-mediated isothermal amplification),RCA(Rolling-circle amplification)等。
    产品组分
    组 分

                                   CSPC0820 (8,000 U)                   

    Bst DNA Polymerase Large Fragmenta(8 U/μl)
              1 ml

     

     

    a. 贮存于10 mM Tris-HCl pH 7.5,50 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% 甘油。

    保存条件
    -30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。
    适用范围
    本产品适用于LAMP,HDA,RCA等多种等温扩增反应。
    单位定义
    65℃、30 min内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位(U)。
    注意事项
    1. 本产品不可用于PCR反应。
    2. 本产品使用温度不超过70℃。
    注意事项  
    1. 在使用本品进行RNA样品中DNA的清除实验时,可在反应体系中添加Murine RNase Inhibitor以保护RNA不被降解。
    2. 部分实验条件下,DNaseⅠ的最佳使用量需要通过实验进行调整。
    3. 失活或抑制:加入终浓度为5 mM的EDTA并经过65℃加热10 min,或通过酚氯仿抽提可使DNaseⅠ失活。此外,使用金属离子螯合剂, 达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50 - 100 mM以上盐浓度均对DNaseⅠ的活性有显著抑制作用。
    常见问题及解决方案
    1.环介导的等温扩增引物如何设计及筛选?
    环介导的等温扩增引物的设计请参考http://primerexplorer.jp/e/,建议使用V4版本。
    具体操作手册登录 下载。环介导等温扩增引物的初步筛选可参照操作手册,具体需要
    通过实验来验证最佳引物。
    2.环介导等温扩增产物可以做酶切鉴定吗?
    可以。但是开盖容易造成气溶胶污染,一定要谨慎操作。
    3.加环引物出现假阳性,不加就正常,是什么原因?
    若环引物经验证没有污染,则可能是环引物导致了非特异的扩增,这种情况下建议不使用环引物或者更换别的环引物。
    Note
    For research use only .